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關于PCR儀您了解多少?

瀏覽次數:91發布日期:2022-03-14
  PCR儀已成為一種潮流。反應時間從90分鐘縮短到30分鐘,是受歡迎的,畢竟誰也不想在預約時排隊等太久。溫度循環是所有PCR的基礎。變溫速率將決定PCR運行的整體速度。毫無疑問,變溫越快,PCR運行也越快。宣傳資料往往也會首先展示zui高變溫速率以暗示運行速度更快。因此,在拿到參數表時,我們先會留意變溫速率,也就是升降溫速率。當然,樣品的變溫速率可沒有模塊那么高。這就好比在爐子上燒水,爐子很快就達到100℃以上,但水可能只有50℃。模塊的熱量傳遞到樣品還需要一定的滯后時間。因此,只根據模塊溫度編程而不考慮樣品體積的變溫速率并不能算準確。這個參數能反應儀器根據體積來控制樣品達到設置溫度、遵循預設的實驗方案運行的真實能力,更有效地評估真實性能。
  PCR儀通常由熱蓋部件、熱循環部件、傳動部件、控制部件和電源部件等部分組成。在普通PCR儀設計基礎上增加熒光信號激發和采集系統和計算機分析處理系統,形成了具有熒光定量PCR功能的儀器。其PCR擴增原理和普通PCR擴增原理相同,在PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統,得出量化的實時結果輸出。
  有單通道,雙通道和多通道之分。當只用一種熒光探針標記的時候,選用單通道;有多種熒光標記的時候使用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記和目的基因表達產物,因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量,需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,實現一次檢測多種目的基因的功能。
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