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PCR儀溫度校準目前的使用情況

瀏覽次數:147發布日期:2022-01-19
  PCR又名聚合酶鏈式反應,屬于一種分子生物學技術,主要用來在短期內放大特定的DNA片段。而PCR儀重要的功能就是自動的完成聚合霉反應,并為DNA片段的放大提供一定的溫度條件。當儀器在運行的過程中,主要分為三個特征溫度循環,一種是高溫變性,具體方法是將DNA樣本加熱到90~95℃,讓其模板轉變為單鏈結構;另一種是低溫退火,是將DNA樣本的溫度降到50~65℃,使之能夠與引物相結合;第三種則是適溫延伸,就是采用再次升溫至70~75℃的方法來完成新鏈的復制。由此可見,PCR儀溫度的準確性與實驗的操作息息相關。
  PCR儀溫度校準目前的使用情況:
  目前PCR儀在醫學聚合酶鏈式反應檢測中的使用平率較高,如用于親子鑒定以及個體識別等,這樣就導致了在使用的過程中各項指標有可能發生偏差,而且將后期的校準工作交給出廠商或者是由儀器自己進行校準,這樣就不能保證在檢測的過程中所有數據的準確性。由于PCR儀具有升降溫速度快的特點,因此所選用的溫度傳感器的熱慣性要小才能達到標準。因此溫度傳感器的準確性對實驗的結果也有重要的影響,一般進行校準的方法為:溫度點在30度時,持續1分鐘:溫度點在95度時,持續3分鐘;溫度點在30度時,持續2分鐘;溫度點在90度時,持續3分鐘;溫度點在50度時,持續3分鐘;溫度點在70度時,持續3分鐘;溫度點在60度時,持續3分鐘;溫度點在30度時,持續1分鐘,再借助系統軟件將檢測的數據進行系統分析。
  PCR儀溫度校準技術是一項分子生物學檢測技術,在目前的臨床檢測以及司法檢測中被大力的推廣應用,在進行檢測的過程中會出現很多原因造成結果的不準確性,因此對其進行定期的校準時絕對有必要的。
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